Avanzando hacia alternativas más seguras

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076-ES, General section

Sustitución de la formamida por hidróxido sódico y etanol en la desnaturalización del ADN, en la preparación de la hibridación in situ fluorescente (FISH).

Resúmen

La formamida se utiliza para desnaturalizar el ADN en la hibridación in situ fluorescente (FISH). La función principal de la formamida es obtener una cadena sencilla de ADN en la muestra y así poder unir una sonda a la cadena restante. La técnica FISH permite localizar la presencia o la ausencia de secuencias específicas de ADN en los cromosomas.

Durante los últimos 15 años, el Departamento de Genética Clínica del Hospital Universitario de Sahlgrenska (Suecia) ha sustituido la solución de formamida al 70 % por 30 ml de una solución de hidróxido sódico al 1,9 % y 70 ml de etanol absoluto (99,5%). La alternativa de sustitución es eficaz y el personal no ha observado limitaciones específicas con este método.

  1. Formamida

    Núm. CAS 75-12-7 Núm. EC 200-842-0 Núm. Index 616-052-00-8

Sustancia alternative(s)

  1. Hidróxido de sodio

    Núm. CAS 1310-73-2 Núm. EC 215-185-5 Núm. Index 011-002-00-6
  2. Etanol

    Núm. CAS 64-17-5 Núm. EC 200-578-6 Núm. Index 603-002-00-5

Otro tipo de alternativa

Fiabilidad de la información

Evidencia de implementación: hay evidencia de que la solución fue implementada y estaba en uso en el momento de publicación


Evaluación de peligros

Las sustancias alternativas se clasifican como R35: causa quemaduras graves, y R11: fácilmente inflamable. Por su parte, la formamida puede causar daños fetales.

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Descripción del proceso de sustitución

La formamida se ha empleado anteriormente en la hibridación in situ fluorescente (FISH), una técnica para localizar la presencia o la ausencia de secuencias específicas en el ADN. La técnica comprende la separación de las dos cadenas de ADN (por acción de la formamida), de manera que se pueda unir una sonda diseñada específicamente a una de las cadenas, en la secuencia de ADN deseada.

Desde hace 15 años, el Departamento de Genética Clínica del Hospital Universitario de Sahlgrenska ha sustituido la formamida por hidróxido sódico y etanol en todos los análisis de FISH.

El método empleado de sustitución es el siguiente: las muestras -extendidas en portaobjetos de vidrio- se desnaturalizan con una solución recién preparada de 30 ml de hidróxido sódico al 1,9 % y 70 ml de etanol absoluto (99,5 %), durante 6 min. Luego, se deshidratan con la misma solución anterior pero enfriada. El proceso de deshidratación  tiene lugar por el aumento -en cada paso- de la concentración de etanol en la mezcla de hidróxido sódico y etanol. Después del paso en que se emplea la solución fría de etanol al 70%, tienen lugar dos pasos más, el primero con etanol al 90% y el segundo, con etanol al 100%. La ventaja de este método de sustitución es que el laboratorio no tiene que emplear formamida, sustancia peligrosa y de uso limitado. El personal del departamento no ha identificado hasta la fecha ningún inconveniente con el método de sustitución.

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Evaluación del caso/sustitución

La formamida puede causar daños fetales y no es adecuada desde el punto de vista de la salud laboral. Las sustancias alternativas son favorables, pero hay que manipularlas con precaución por ser inflamables y provocar quemaduras.

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Más información

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Quién proporcionó la información

Tipo de suministrador de la infromación
Investigador
Usuario

Contacto 

Coordinador Medioambiental del Departamento de Genética Clínica, Hospital Universitario de Sahlgrenska (Suecia).


Fuente de la publicación

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